omega試劑盒是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的試驗確診方法。在試劑盒中一般有兩次抗原抗體反響,即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后??乖贵w反響的完結(jié)需要有一定的溫度和時刻,這一保溫進程稱為溫育,有人稱之為孵育,在ELISA中似不恰當(dāng)。盡管操作過程看似簡單,但沒做到位的話就會影響試驗的作用,所以在試驗過程中這幾點非常重要:
1、重要的洗刷:
不充分的洗刷會導(dǎo)致差異和高布景,從而帶來不抱負(fù)的試驗結(jié)果。假如未結(jié)合的材料殘留在微孔板中,那么它會添加布景噪音。有必要的話,可添加洗刷液中的鹽濃度,這會阻止非特異結(jié)合反響。假如布景過高,置疑洗刷不行時,能夠測驗添加洗刷次數(shù)。
3、抗體濃度須優(yōu)化:
假如試劑稍有不同,則或許需求優(yōu)化抗體的量。非特異的抗體結(jié)合會添加布景。為了防止這一點,切勿運用過多的一抗或二抗。
2、關(guān)鍵的關(guān)閉:
關(guān)閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位點。這就降低了可產(chǎn)生信號的抗體非特異結(jié)合的時機。假如布景過高,置疑關(guān)閉不充分,那么能夠測驗運用更高濃度的關(guān)閉液,或適當(dāng)延伸關(guān)閉時間。
現(xiàn)在主要有兩種類型的關(guān)閉液:蛋白和非離子型去污劑。omega試劑盒運用的類型須取決于多個因素,包括微孔板的表面試劑、吸附的抗原、抗體和檢測試劑。好的關(guān)閉液應(yīng)降低非特異性結(jié)合,但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、抗體或檢測試劑發(fā)生相互作用。
4、檢測試劑要適量:
切勿運用過多的檢測試劑。假如濃度過高,或許未正確稀釋,則會導(dǎo)致高布景。也不要顯色過度,如有必要,優(yōu)化一下何時應(yīng)加入終止液。
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