必須了解的
抗體檢測(cè)試劑盒基礎(chǔ)知識(shí)
抗體檢測(cè)試劑盒用純化的抗原包被微孔板,往包被抗體的微孔中同時(shí)加入酶標(biāo)的抗體和待測(cè)抗體,被測(cè)抗體與酶標(biāo)記抗體對(duì)特異性抗原進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合。經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。待測(cè)標(biāo)本濃度越高,標(biāo)記抗體和抗原的結(jié)合就越受到抑制,顯色愈淺。顯色的深淺與酶量呈正相關(guān),而與樣品中待測(cè)物質(zhì)含量呈負(fù)相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
今天小編要為各位帶來(lái)的是抗體檢測(cè)試劑盒相關(guān)事項(xiàng)說(shuō)明說(shuō)明:
1、只有全部使用抗體檢測(cè)試劑才能保證檢測(cè)效果,因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守抗體檢測(cè)試劑的試驗(yàn)說(shuō)明才會(huì)得到較佳的檢測(cè)結(jié)果。
2、在儲(chǔ)存及孵育過(guò)程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。
3、濃洗滌液會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
4、剛開(kāi)啟的酶標(biāo)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。
操作抗體檢測(cè)試劑盒需注意:
1、不同廠家生產(chǎn)的抗體檢測(cè)試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同,務(wù)必按照抗體檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)嚴(yán)格操作,否則容易產(chǎn)生檢測(cè)結(jié)果的不確定性.
2、若不同批號(hào)抗體檢測(cè)試劑盒的不同組分(a液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進(jìn)行交叉使用,有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高,花板等情形。
3、反應(yīng)時(shí)間的誤差,做大量標(biāo)本時(shí),孔和后一孔以及一些特殊標(biāo)本可能影響較大。
4、臨界值附近標(biāo)本波動(dòng)為正?,F(xiàn)象,任何試劑均不可避免??梢钥紤]將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。
5、加樣時(shí)樣品量誤差,對(duì)于陰或很陽(yáng)的標(biāo)本影響不大,但對(duì)閾值附近的標(biāo)本影響極大,建議校對(duì)加樣器。